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掃描電鏡的樣品前處理方式歸納

更新時(shí)間:2020-08-17      點(diǎn)擊次數(shù):1463
   掃描電鏡在進(jìn)行觀察前,要對(duì)樣品作相應(yīng)的處理。掃描電鏡樣品制備的主要要求是盡可能使樣品的表面結(jié)構(gòu)保存好,沒(méi)有變形和污染,樣品干燥并且有良好導(dǎo)電性能。
  1.樣品的初步處理
  ①取材取材的基本要求和透射電鏡樣品制備相同。但對(duì)掃描電鏡來(lái)說(shuō),樣品可以稍大些,面積可達(dá)8×8mm,厚度可達(dá)5mm。對(duì)于易卷曲的樣品如血管、胃腸道粘膜等,可固定在濾紙或卡片紙上,以充分暴露待觀察的組織表面;
  ②樣品的清洗用掃描電鏡觀察的部位常常是樣品的表面,即組織的游離面。由于樣品取自活體組織,其表面常有血液、組織液或粘液附著,這會(huì)遮蓋樣品的表面結(jié)構(gòu),影響觀察。因此,在樣品固定之前,要將這些附著物清洗干凈;
  ③固定用試劑和透射電鏡樣品制備相同,常用戊二醛及鋨酸雙固定。由于樣品體積較大,固定時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)。也可用快速冷凍固定;
 ?、苊撍畼悠方?jīng)漂洗后用逐級(jí)增高濃度的酒精或丙酮脫水,然后進(jìn)入中間液,一般用醋酸異戊酯作中間液。
  2.樣品的干燥掃描電鏡觀察樣品要求在高真空中進(jìn)行。無(wú)論是水或脫水溶液,在高真空中都會(huì)產(chǎn)生劇烈地汽化,不僅影響真空度、污染樣品,還會(huì)破壞樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu)。
  3.樣品的導(dǎo)電處理生物樣品經(jīng)過(guò)脫水、干燥處理后,其表面不帶電,導(dǎo)電性能也差。用掃描電鏡觀察時(shí),當(dāng)入射電子束打到樣品上,會(huì)在樣品表面產(chǎn)生電荷的積累,形成充電和放電效應(yīng),影響對(duì)圖象的觀察和拍照記錄。

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